Este episodio conmemora el quinto centenario de las bodas de Carlos V e Isabel de Portugal, un acontecimiento que convirtió a Andalucía en el centro político, diplomático y cultural de Europa durante 1526. A través de una narración que viaja entre el presente y el pasado, el episodio reconstruye la llegada de la futura emperatriz a Sevilla, la entrada del monarca en la ciudad, las ceremonias celebradas en el Real Alcázar y la posterior estancia de la corte en Granada.

Con las aportaciones de historiadores y especialistas de la Universidad de Sevilla, el episodio explica por qué este matrimonio fue mucho más que una unión personal. El enlace selló la alianza entre las coronas de Castilla y Portugal, abrió el camino hacia una futura unión dinástica y reforzó la posición de Carlos V en un momento marcado por los conflictos con Francia, la expansión otomana, la Reforma protestante y el crecimiento de los territorios americanos. También se analiza la figura de Isabel de Portugal, su formación, su influencia política y su papel como regente durante las frecuentes ausencias del emperador.